Unterschied zwischen Northern & amp; Southern-Blot

Biologie ist eine Herausforderung für viele Gründe. Einer dieser Gründe ist die Schwierigkeit bei der Untersuchung von Makromolekülen --- Moleküle, die Hunderte oder Tausende von kleineren Moleküleinheiten aneinandergereiht . Wenn nur ein oder zwei der kleineren Moleküleinheiten ausgelagert , die Makromoleküle ihre Eigenschaften ändern . Biologen müssen irgendwie messen sehr kleine Änderungen in einem sehr großen Molekül. Natürlich "groß" bedeutet nicht groß genug, um zu behandeln oder zu sehen, so Biologen brauchen besondere Werkzeuge, um solche Messungen zu machen. Blotting ist einer dieser Werkzeuge. Gel-Elektrophorese

Alle Blotting-Techniken beginnen mit Gelelektrophorese. Das Gel ist mehr oder weniger wie eine dünne Rechteck von Gelatine. Eine kleine Menge einer speziell präparierten biologischen Moleküle auf dem Gel an einem Ende , dann wird ein elektrisches Feld von einem Ende zum anderen aufgebracht setzen . Die hergestellten Moleküle sind elektrisch geladene , so dass das elektrische Feld zieht sie durch das Gel . Sie bewegen sich langsam durch die dicken Gel , bis das Feld abgeschaltet wird. Die leichteren Moleküle werden schneller gezogen und bewegen weiter , die schwereren Moleküle länger dauern, bis so bewegen sie machen es nicht so weit .
Verwendung von Gelen

In der Praxis , verschiedene Proben legte sich entlang einer Kante des Gels zu verbreiten. Nachdem das elektrische Feld angelegt wird , breiten sich die verschiedenen Proben aus Richtung der gegenüberliegenden Kante des Gels. Die Ausbreitung von jeder Probe wird als " Spur ". Die Spur wird in der Regel ein paar verschiedene Banden, die Moleküle mit unterschiedlichen Gewichten in jeder Probe. Es gibt verschiedene Möglichkeiten, die Banden sichtbar . Analyse der Gel gibt Biologen eine Vorstellung von der Größe der verschiedenen Moleküle , sondern um mehr Informationen zu erhalten, ist eine andere Methode erforderlich . Das ist, wo Blotting kommt .
Blotting

Blotting ist eine Art der Einnahme , die Moleküle , die auseinander im Gel verteilt wurden und deren Bereitstellung für mehr Analyse. In der gleichen Weise Löschpapier saugt lose Tinte --- oder hat in den Tagen, als die Leute verwendet Füllfederhalter --- biologischen Blotting " saugt " die Moleküle aus dem Gel in einem anderen Material . Die Moleküle am Ende in dem gleichen Muster , aber jetzt in einem speziellen Papier oder Kunststofffolie . Die Moleküle gehen auf das Blatt gebunden , so dass sie nicht mehr bewegen, und dann können sie in einer Lösung von anderen Sondenmoleküle , die mehr Informationen über die Moleküle bieten eingeweicht werden. Es gibt verschiedene Möglichkeiten , dies zu tun , diese Schritte, aber das Prinzip ist das gleiche für alle von ihnen.
Southern, Northern und Western Blot

Biologe Edwin südlichen war die erste, der eine Blot-Technik zu entwickeln. Er entwickelte alle notwendigen Angaben , zuversichtlich zu sein , dass die DNA -Gelelektrophorese konnte genau übertragen und Löschmaterialgemessen werden. Das Verfahren wurde nach ihm benannt : Southern-Blot . Andere Wissenschaftler herausgefunden, wie die gleiche allgemeine Technik der Arbeit für die RNA zu machen, und --- in typischen lustige Wissenschaftler Stil --- nannten ihre detaillierte Verfahren Northern Blot . Später wurde das Verfahren zur Messung der modifizierten Proteine ​​und hieß Western Blot . Alle drei Techniken verwenden, die gleichen Grundsätze : . Südlichen Maßnahmen DNA , RNA Northern Maßnahmen , Western Maßnahmen Proteine ​​