Wie man ein Bis-Tris- Transferpuffer Stellen

ist die Kopplung von Bis -Tris Biochemie wichtig wegen seiner Fähigkeit, als Zwitterion handeln , die über eine positive und negative Ionen auf das Molekül . Es kann als ein Puffer im Bereich von pH 7,6 dienen . Es wird auf die in der Elektrophorese verwendet , um die Moleküle in Lösung halten und hilft bei der Trennung der Moleküle Gele aufgenommen. Übertragungspuffer zu entfernen Moleküle aus Gel -Elektrophorese Platten Analyse und übertragen Sie sie auf Membranen für Western-Blot . Jeder Hersteller von Elektrophoresekammern Berichte etwas andere Rezepte für einen Transfer -Puffer, aber die folgende ist für den Transfer -Puffer mit NuPAGE Systeme auf nicht reduzierte samples.Things verwendet Sie
Bicine
Bis- Tris
EDTA
250 ml-Becherglas
Methanol
1000 ml Flasche
Reinstwasser
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die Zutaten für die Puffer durch Wiegen vorbereiten aus den Mengen der einzelnen Komponenten auf einer Analysenwaage . Die drei trockenen Komponenten für einen Transfer Puffer Bicin , Bis -Tris und EDTA . Gewicht aus 4,08 g Bicin , 5,23 g Bis- Tris und 0,29 g EDTA auf einzelne Wiegepapiere .
2

Fügen Sie diese Komponenten zu einem 250 ml-Becherglas . Löst diese Komponenten mit 100 ml Methanol versetzt. Rühren, bis die Feststoffe zu lösen.
3

Übertragen Sie die gelösten Komponenten in einen 100 -ml-Flasche und waschen Becherglas mit hochreinem Wasser , um die Übertragung aller Komponenten zu gewährleisten.
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Füllen Sie den Rest der 1 -Liter- Volumen mit hochreinem Wasser . Fügen Sie das Wasser in Teile, die eine ausreichende Durchmischung zwischen jeder Zugabe zu ermöglichen. Den Inhalt gründlich mischen, um eine gleichmäßige Konzentration zu erzielen.