Wie man Gradientengelen Gießen

Ein Gradient Gel ein Gemisch von zwei Konzentrationen von Acrylamid- Gel, das in einer Weise , um einen glatten Übergang von einer hohen Konzentration von Acrylamid an der Unterseite zu einem helleren Konzentration an der Spitze zu schaffen gegossen werden . Sie werden im allgemeinen in Kassetten , die das Gel zwischen zwei Glasscheiben sandwichartig gepumpt. Gradient Gel- Kassetten werden im Labor verwendet werden, um Proteingewichtebestimmen und die Migrationseigenschaften der schweren organischen molecules.Things Sie
Gelkassette Brauchen
2-Kammer- Gradient -Hersteller
Rühren stehen
2 Rührstäbe
Gradient Gel-Lösung
Ammoniumpersulfat (APS )
Tetramethylethylendiamin ( TEMED )
Wasser gesättigten n- Butanol
Weitere Anweisungen
Einrichten der Geräte
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gemäß den Anweisungen des Herstellers Montieren Sie die Gel -Kassette , so dass der Boden der Kassette ist komplett abgedichtet .
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Setzen Sie den Gradienten -Hersteller auf einem Rühren Stand auf einem höheren Niveau als die Oberseite der Kassette . Legen Sie ein Rührstab in jeder Kammer . Schließen Sie alle Filialen und legen Sie das Auslaufrohr in der Oberseite der Kassette so das Gel in der oberen Mitte der Kassette fließen.
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mit Füllen Sie den nonoutlet Zylinder des Gradienten -Hersteller ein Gel-Lösung auf die niedrigste gewünschte Konzentration . Öffnen Sie den Hahn zwischen den beiden Zylindern zu räumen alle Luftblasen und schließen Sie den Wasserhahn . Füllen Sie den Ausgangszylinder mit Gel-Lösung auf den höchsten gewünschten Konzentration gemischt.
Gießen der Gel
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Mix 1 ml APS und 0,1 ml TMED pro 100 ml -Gradienten-Gel in jeden Zylinder .
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Öffnen Sie den Hahn zwischen den Zylindern . Öffnen Sie die Steckdose, um einer Durchflussrate , die die Zylinder in 5-8 Minuten leer wird . Rühren Sie den Inhalt der Ausgangszylinder ständig bis beide Zylinder vollständig entleert .
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Overlay das Gel mit Wasser gesättigt n- Butanol .