Wie Zellkulturmedium Spülen mit Stickstoff

Biologische Untersuchungen von Zellkulturen zu verwenden , um die Auswirkungen von Medikamenten , Therapien und Praktiken auf die Lebenszyklen und Aktivität von Zellen zu untersuchen. Das Wachstum von Zellen und von Zelllinien treten in Kulturmedien , die vorteilhaft für die Zellen in Frage . Die Medien enthält alle Nährstoffe und von den Zellen erforderlich Umweltbedingungen. Die meisten Zellen benötigen eine Stickstoffquelle , um gesund zu bleiben und einige der Anforderungen für die vielen Verfahren werden die Zellen während ihres Lebenszyklus durchlaufen zu liefern. Während Stickstoff erhältlich ist aus Ammoniak und andere stickstoffhaltige Substanzen , Spülen der Medien stellt auch eine Quelle für die benötigten nitrogen.Things Sie
Zellkulturmedium
große Becher
Mechanische Rührer
Stickstoff benötigen Tank
Sparging Rohr
Weitere Anweisungen anzeigen
1

Ihre Zellkulturmedium in einen großen Becher gießen und das Becherglas auf einem mechanischen Rührer . Der Rührer mischt das Medium während der Spülung durch den Stickstoffstrom. Unter Verwendung dieses Verfahrens ermöglicht eine Herstellung einer großen Menge des Mediums , um eine einheitlichere Zusammensetzung zu erhalten.
2

Affix ein Einblasrohr mit dem Ausgang des Stickstofftanks. Ein Einblasrohr aus einem Glasrohr mit einem gesinterten Glasspitze in das Ende des Rohres einge besteht. Das offene Ende des Rohres auf eine Länge von Kunststoffrohr mit einem Stickstofftank verbunden angebracht stellt ein Stickstoffstrom beim Verlassen des Sinterglas Ende des Rohres durch viele Ströme von winzigen Gasblasen .
3

in den Boden des Bechers Legen Sie die Sinterglas Ende der Begasungsrohr und schalten Sie den Mixer. Stellen Sie die Rührgeschwindigkeit des mechanischen Rührer zur Verfügung zu stellen , auch Vermischen des Mediums.
4

auf der Stickstoffstrom bei der Tank Drehen und lassen Sie es Blase in das Medium . Der Stickstoff wird das Medium mit Stickstoff gesättigt , wie es sich auflöst. Jede Flüssigkeit besitzt eine endliche Löslichkeit verschiedener Gase . Da der Stickstoff löst sich in dem Medium , andere gelöste Gase aus dem Medium ausgetrieben wird. Spülung entfernt Gase wie Sauerstoff und Kohlendioxid aus dem Kulturmedium.
5

Erlauben der Stickstoffstrom auf Blase , mindestens 15 Minuten , um das Medium zu sättigen , in Abhängigkeit von der Strömungsgeschwindigkeit des Gases. Sobald die Spülung des Mediums beendet ist, entfernen Sie die Sinterglasrohraus dem Becherglas gespült und übertragen die Zellkulturmedium zu einem geschlossenen Behälter und bewahren Sie sie in den Kühlschrank . Die reduzierte Temperatur des Kühlschranks den Grad , zu dem Gase in das Medium zu lösen während der Lagerung zu reduzieren.