Column Verifikationstechniken in der HPLC

High- Performance Liquid Chromatography (HPLC ) ist ein wertvolles Werkzeug für die moderne organische Chemie , weil es ihnen ermöglicht , nicht nur eine Mischung in ihre Bestandteile zu trennen , sondern auch zu quantifizieren, wie viel von jedem vorhanden ist. Obwohl HPLC -Geräte sind ausgefeilte Instrumente , ihre Leistung nach und nach im Laufe der Zeit verschlechtern . Um sicherzustellen, dass sie richtig funktionieren und zuverlässige Ergebnisse liefern , ist es wichtig , ihre Leistung in regelmäßigen Abständen zu überprüfen. Flow Rate & Druck

Die Pumpe muss in der Lage, eine genaue Durchflussratenzu halten. Testen der Fließgeschwindigkeit ist ziemlich unkompliziert und beinhaltet lediglich die Messung der Menge an Zeit benötigt , um einen willkürlich gewählten Lösungsmittelmenge von der Säule bei verschiedenen Strömungsrateneinstellungenzu sammeln. Der Pumpendruck kann durch Einstecken des Pumpenausgang mit einem toten Mutter und Anschluss eines Recorders an Pumpenkopf Druck zu messen getestet werden. Der Druck sollte schnell auf etwa 3000 Pfund pro Quadratzoll (PSI) zu erhöhen, dann erhöhen Sie nach und nach mehr auf einen höheren Druck , an welcher Stelle die Pumpe automatisch ab. Wenn der Druck schwankt bei 3.000 PSI oder schnell abnimmt , nachdem die Pumpe schaltet ab , es bedeutet in der Regel eine Fehlfunktion , wie ein Leck im System .
Gradient

Die Pumpe muss auch in der Lage , genau zu variieren , die Zusammensetzung des Lösungsmittels oder der mobilen Phase , wodurch Elution oder Spülen der Säule zunehmend unpolare Verbindungen als Prozentsatz der weniger polaren Lösungsmittels erhöht werden . Gradient Genauigkeit wird mit zwei Kanälen in einer Zeit , eines davon bietet reinen Lösungsmittels und der andere ein Lösungsmittel mit einem gelösten chemischen Tracer , wie Koffein getestet. Da die Konzentration der zweiten Lösung steigt , können Sie die ultraviolette (UV) Absorption der Spalte Ausgang messen und diese Daten, um Gradienten Richtigkeit zu überprüfen .
Injector Module

Präzision des Einspritzmodulskann durch Ausführen sechs Wiederholungsinjektionenmit einer einzigen Probe getestet werden ; erhebliche Unterschiede in den Ergebnissen schlage vor, Sie haben ein Problem. Einige Experimente beinhalten variable Injektionsvolumen , so ist es auch wichtig, um der Einspritzdüse Fähigkeit, die entsprechende Menge der Probe ziehen zu testen. Mit der Durchführung von Injektionen über die 0 bis 100 Mikroliterbereich , kann ein Chemiker Daten zu erhalten und zeichnen und zu bestimmen, die Korrelation zwischen den Ergebnissen und der Probenkonzentration . Eine schwache Korrelation deutet auf eine Fehlfunktion.
Detektormodul

Das Detektormodul Datensätze Absorption für Stoff-und Lösungsmittel eluierenden oder aus dem Boden der Säule fließen, so ist die Genauigkeit besonders entscheidend für die Gewährleistung gute Ergebnisse. Viele HPLC-Geräte verfügen über eine integrierte Verifikations Wellenlänge Möglichkeit, sicherzustellen, dass die Wellenlänge der Detektor verwendet, ist die gleiche wie die, die Sie ausgewählt haben. Ein weiterer Test beinhaltet die Verwendung einer Reihe von Proben , die eine zunehmende Konzentration einer Verbindung, wie Koffein enthalten . Der Chemiker kann dann zeichnen die Ergebnisse gegenüber der Testlösung Konzentration und bestimmen die Stärke der Korrelation . Eine schwache Korrelation deutet auf eine Fehlfunktion.