Wie ein Parasit der apicoplast Zellen in einer Kultur wachsen

Apicoplasts sind eine Art von intrazellulären Organellen in einzelligen Parasiten, die schwere Krankheiten wie Malaria, Toxoplasmose und Kokzidiose verursachen Gegenwart. Organellen sind komplexe Strukturen innerhalb einer Zelle , die nicht wachsen und vermehren sich von selbst können . Sie entstand, als ein Vorfahre der Parasiten verschlungen weiteren Organismus, die wahrscheinlich Rotalgen verwandt war . Da apicoplasts nicht unabhängig Zellen , können sie nicht in einer Kultur von selbst gezüchtet werden. Um zu wachsen , muss man die Parasiten wachsen. Was folgt, sind Anweisungen zur Kultur der roten Blutzellstadiumvon Plasmodium falciparum, die bewirkt, dass malaria.Things Sie
Parasite Bilder
RPMI 1640 Kulturmedium
Laminarströmungshaube
Autoklav
Albumax Brauchen II Serumersatz
D-Glucose
Hypoxanthin
HEPES
Gentamicin -Sulfat
Zellkulturflaschen
Inkubator
Rote Blutkörperchen
Weitere Anweisungen anzeigen
Kultivierung Plasmodium falciparum
1

Stellen Sie den Zellenbrutschrank auf 37 Grad Celsius und stellen Sie die Gaszusammensetzung zu 1 Prozent Sauerstoff, 3 Prozent Kohlendioxid und 96 Prozent Stickstoff.
2

Autoklav alle nicht- steriler Ausrüstung und Materialien
3

Arbeiten in der Sterilbank , um die Sterilität zu erhalten, bereiten das endgültige Medium indem Sie den folgenden auf die RPMI 1640 Kulturmedium :

D -Glucose in einer Endkonzentration von 20 mM .

Hypoxanthin zu einer Endkonzentration von 0,2 mM .

HEPES bis zu einer Endkonzentration von 25 mM .

Gentamicinsulfat bis zu einer Endkonzentration von 25 mg /L.

Albumax II auf eine Endkonzentration von 0,5 Prozent w /v
4

Verteilen der Gesamtmenge an Medium hergestellt der vorherige Schritt in so viele Kulturflaschen wie gewünscht und legen Sie sie auf dem Schüttler im Brutschrank .
5

Sobald das Medium 37 Grad Celsius erreicht , fügen Sie den Parasit Lager.
6

das Kulturmedium wechseln jeden Tag, um die Parasiten satt und lebendig zu halten.
7

hinzufügen roten Blutkörperchen jeden zweiten Tag. Sie werden durch die neuen Parasiten, die in der Kultur erzeugt werden infiziert werden. Wenn sie sich zu viele für einen Kolben , teilen Sie den Inhalt in zwei oder mehr zusätzliche diejenigen.